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凍干菌種復(fù)蘇操作方法

發(fā)布時間： 2019-09-03　　點擊次數(shù)： 27148次

技術(shù)資料凍干菌種復(fù)蘇操作方法

1、檢查產(chǎn)品的有效期，按照說明書準備好菌株復(fù)蘇所需要的75%消毒酒精、廢液缸、接種
環(huán)、鑷子、打火機、酒精燈與培養(yǎng)基平板、斜面。
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2、用75%酒精對產(chǎn)品表面進行消毒。待干，按照瓶藍蓋上箭頭方向剝開密封包裝。

3、調(diào)校移液槍（或準備無菌吸管）。吸取配套的復(fù)蘇液體約300-500uL。

4、將復(fù)蘇液直接添加到凍干菌粉瓶中，用移液槍或吸管反復(fù)吸打混勻（注意：吸打時槍頭不
能離開液面，避免產(chǎn)生氣溶膠）。

5、燒環(huán)，挑取滿一環(huán)菌液，劃線至試管斜面中（M1，代菌株可以用于保存）。

6、燒環(huán)，挑取滿一環(huán)菌液，劃線至平板瓊脂中（M1，代菌株用于工作實驗）。
（備注：同時吸取少量的菌懸液，約50-100uL直接滴加到平板中央，以防劃線平板、斜面無法成功復(fù)蘇）。

7、用油性筆寫上菌種信息、日期、代數(shù)等信息，按說明要求放置于適應(yīng)溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

8、將剩余的菌懸液和接種平板、斜面同時培養(yǎng)，如成功復(fù)蘇，平板和斜面均生長良好。

9、注意事項
（1）請開凍干之前檢查產(chǎn)品的完整性，是否仍在保質(zhì)期內(nèi)。
（2）操作之前必須先詳細閱讀使用說明書，并準備好需要的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。
（3）凍干菌粉和配套肉湯均為一次性使用產(chǎn)品，開啟后不能再次保存。
（4）如培養(yǎng)之后平板和斜面均無菌生長，請將同時培養(yǎng)菌懸液再次劃線新的平板和斜面。
（5）使用之后的剩余產(chǎn)品必須經(jīng)過生物無害化處理（121℃，滅菌15 分鐘滅活。）

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